胎牛血清是在母牛懷孕3-8個(gè)月時(shí)，通過胎牛心臟穿刺采血獲得新鮮的胎牛全血，經(jīng)自然層析、離心后收集得到去除血細(xì)胞、纖維蛋白等成分的淡黃色透明上清液體，并在生產(chǎn)過程使用多級(jí)高置流膜過濾技術(shù)和三級(jí)0.1um終端微濾方法處理而的血清。相比于新生牛和小牛血清，胎牛血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有傷害的成分最少，因此對(duì)于一些較“脆弱”的細(xì)胞如干細(xì)胞、原代細(xì)胞，—定要使用優(yōu)質(zhì)的胎牛血清進(jìn)行培養(yǎng)。胎牛血清的內(nèi)毒素含量多少為宜？
有下列情況者，對(duì)血清內(nèi)毒素應(yīng)格外留意篩選：
1.養(yǎng)干細(xì)胞時(shí)，干細(xì)胞對(duì)內(nèi)毒素非常敏感，如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時(shí)，干細(xì)胞很容易死亡。很多使用者，在血清在試用前，就通過提早審核該批次《檢測(cè)報(bào)告》，以決定是否入圍進(jìn)行試用。
2.養(yǎng)免疫細(xì)胞時(shí)，過高的內(nèi)毒素可誘導(dǎo)免疫細(xì)胞釋放炎癥因子，抑制小鼠紅細(xì)胞集落的形成等。
3.基因敲除相關(guān)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)的細(xì)胞要盡可能保持其原始狀態(tài)，任何引導(dǎo)細(xì)胞衰老或凋亡的試劑，都會(huì)讓后續(xù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果“失之毫厘，謬以千里”。在準(zhǔn)備血清和其他試劑時(shí)，選擇極低的內(nèi)毒素（最好≤1EU/ml），對(duì)實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要；
4.原代培養(yǎng)、雜交瘤融合、細(xì)胞轉(zhuǎn)染，或者肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、內(nèi)皮等難養(yǎng)細(xì)胞的擴(kuò)增，這些都需要挑選好的血清給細(xì)胞以有力支持。因此，挑選更低的內(nèi)毒素，是保證實(shí)驗(yàn)順利的第一步。
5.實(shí)驗(yàn)室有些細(xì)胞，需要長(zhǎng)期培養(yǎng)、長(zhǎng)期凍存，或者經(jīng)常復(fù)蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的，血清會(huì)經(jīng)常或長(zhǎng)時(shí)間作用于細(xì)胞。為保證細(xì)胞的健康，都應(yīng)該選用更低內(nèi)毒素的血清，以避免內(nèi)毒素長(zhǎng)久對(duì)細(xì)胞的毒性影響。
總之，血清中內(nèi)毒素含量過高，更容易導(dǎo)致細(xì)胞“亞健康”，造成數(shù)據(jù)不準(zhǔn)，或細(xì)胞狀態(tài)不良、老化、甚至死亡，導(dǎo)致試驗(yàn)中斷失敗。血清中的內(nèi)毒素越低越好。
全球細(xì)胞培養(yǎng)學(xué)會(huì)均依據(jù)內(nèi)毒素對(duì)血清的品質(zhì)進(jìn)行分級(jí)和命名。
內(nèi)毒素含量越低的血清，級(jí)別就越高，以胎牛血清為例：
當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≤10EU/ml時(shí)，此血清為特級(jí)胎牛血清；
當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量﹥10EU/ml，≤ 25EU/ml時(shí)，此血清為優(yōu)級(jí)胎牛血清；
當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≥ 25EU/ml時(shí)，此血清為標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清；
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